服务项目

细胞划痕迁移检测

服务概述

细胞划痕实验(Wound Healing)是一种操作简单,经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。这种方法的原理是,当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域,称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。基本的步骤包括“划痕”的制造,细胞迁移期间图像的获得以及后期数据的处理。

服务周期:

技术介绍

细胞划痕实验(Wound Healing)是一种操作简单,经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。这种方法的原理是,当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域,称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。基本的步骤包括“划痕”的制造,细胞迁移期间图像的获得以及后期数据的处理。

实验流程

实验步骤

  1. 1.先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。
  2. 2.在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。
  3. 3.第二天用枪头比着直尺,尽量垂至于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜。
  4. 4.用PBS洗细胞3次,去处划下的细胞,加入无血清培养基。
  5. 5.放入37度5%co2培养箱,培养。按0,6,12,24小时取样,拍照。

案例:实验结果展示

注意事项

  • 一般做划痕实验,都是在无血清或者底血清状态下培养的,否则细胞增殖就不能忽略。 按照6孔板背后画线的垂直方向划痕,可以形成若干交叉点,作为固定的检测点,这就解决了前后观察时位置不固定的问题。