服务项目

稳定细胞株的构建

服务概述

构建稳定细胞株的基本原理是将外源DNA克隆到具有某种抗性的载体上,载体被转染到宿主细胞并整合到宿主染色体中,用载体中所含的抗性标志进行筛选,最常用的真核表达载体的抗性筛选标志物有新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)和嘌呤霉素(puromycin),常用G418来代替新霉素进行选择性筛选,筛选得到可稳定表达目的蛋白,或者稳定表达沉默特定基因的细胞株。

服务周期:

技术介绍

构建稳定细胞株的基本原理是将外源DNA克隆到具有某种抗性的载体上,载体被转染到宿主细胞并整合到宿主染色体中,用载体中所含的抗性标志进行筛选,最常用的真核表达载体的抗性筛选标志物有新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)和嘌呤霉素(puromycin),常用G418来代替新霉素进行选择性筛选,筛选得到可稳定表达目的蛋白,或者稳定表达沉默特定基因的细胞株。

  • 基因过表达(重组蛋白持续生产)
  • 基因沉默(shRNA介导的靶向抑制)
  • 基因编辑(CRISPR-Cas9介导的敲除/敲入)

津科生物特色服务

  • crispr-cas9基因敲入或敲除细胞株构建
  • R干扰稳定细胞系构建
  • 过表达稳定细胞系构建
  • 定点突变细胞株

服务流程

客户提供

  1. 1.如客户不能提供载体的,需提供载体构建所需的相关信息,如载体类型,插入片段的序列信息等;
  2. 2.构建稳定细胞株所需细胞系的选择;
  3. 3.与构建稳定细胞株相关的其他信息。

实验报告内容

  1. 1.本公司构建载体的,提供载体及带有载体的菌液各一份及相关的序列信息;
  2. 2.构建成功的稳定细胞株,转染后需要检测的,参考相关实验服务;
  3. 3.构建稳定细胞株实验所需试剂耗材、仪器设备、实验方法各一份;
  4. 4.其他与构建稳定细胞株相关的信息。