服务项目
Elisa
服务概述
ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体（聚苯乙烯）微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。
服务周期：
技术介绍
ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体（聚苯乙烯）微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。
实验流程
实验步骤
- 1.样本准备：血清、血浆、组织匀浆、细胞上清
- 2.操作步骤：
- 双抗夹心法：处理样本配制标准品→加样→洗板→加检测抗体溶液→孵育→洗板→加酶溶液→孵育→洗板→加TMB底物→加终止液50μL→450nm读数
- 竞争法：处理样本配制标准品→加样→加酶溶液→加检测抗体→混匀孵育→洗板→加TMB显色→加终止液50μL→450nm读数
- 3.实验结果：将样本OD值代入标准曲线计算浓度，结果以EXCEL形式输出
案例结果展示
注意事项
- 1.在使用试剂盒时，从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，加热至40℃使结晶完全溶解再配制洗涤液；
- 2.充分混匀对反应结果尤为重要，最好使用微量振荡器；
- 3.标准品分装后保存于-20℃~-70℃，避免反复冻融。