服务项目
植物硬组织包埋
服务概述
本方法针对较硬的未软化的植物组织,利用MMA(即甲基丙烯酸甲酯)包埋。采用莱卡硬组织切片机配合钨钢刀片对MMA包埋的植物组织进行切片。然后对植物硬组织切片进行脱塑及后续特殊染色,用于观察植物的木质部结构。
服务周期:
技术介绍
本方法针对较硬的未软化的植物组织,利用MMA(即甲基丙烯酸甲酯)包埋。采用莱卡硬组织切片机配合钨钢刀片对MMA包埋的植物组织进行切片。然后对植物硬组织切片进行脱塑及后续特殊染色,用于观察植物的木质部结构。
实验流程
- 1.组织固定
- 2.梯度脱水
- 3.二甲苯透明
- 4.MMA浸塑
- 5.包埋聚合
实验步骤
步骤1:样本预处理
取5mm厚木块浸入FAA固定液(福尔马林:醋酸:70%乙醇=1:1:18)4℃固定7天,每48小时更换固定液
步骤2:梯度脱水
70%乙醇(24h)→85%乙醇(24h)→95%乙醇(24h)→无水乙醇(24h×2次)
步骤3:MMA浸塑
乙醇:MMA=3:1(24h)→1:1(24h)→纯MMA(含0.05% DBP,72h),40℃震荡渗透
步骤4:包埋聚合
硅胶模具注胶,40℃预聚3天→55℃硬化2天,包埋块硬度达80-85 Shore D
案例与结果展示
送样运输要求
- 样本规格:5×5×3mm³木块(径向×弦向×轴向)
- 固定要求:FAA固定液完全浸没,固定液:样本=20:1(v/v)
- 运输包装:双层密封袋+缓冲木屑填充,附样本来源说明
- 禁忌:禁止烘干处理(导致细胞壁塌陷)
注意事项
- MMA需添加0.05%邻苯二甲酸二丁酯(DBP)改善韧性
- 浸塑阶段保持40±1℃恒温,温度波动>2℃会导致分层
- 切片角度需与导管轴向呈15-30°夹角,钨钢刀片厚度0-5μm
- 脱塑处理:二甲苯浸泡48小时后进行番红固绿染色