服务项目
细胞芯片蜡块制作
服务概述
细胞芯片(细胞微阵列Cell microarray,CMA),是将许多不同处理的细胞以规则的微阵列方式排列于同一载体上,同时进行相同指标检测的原位细胞学研究。该技术具有高通量 、标准化、可重复性高、操作简便等优点。有效解决了细胞爬片细胞易脱落、批间差异大、工作量繁杂、准确性低的问题。细胞芯片是目前基因芯片、蛋白芯片、组织芯片的有力补充。解决了细胞水平高通量、高效检测的困境。
服务周期:
技术介绍
细胞芯片(细胞微阵列Cell microarray,CMA),是将许多不同处理的细胞以规则的微阵列方式排列于同一载体上,同时进行相同指标检测的原位细胞学研究。该技术具有高通量 、标准化、可重复性高、操作简便等优点。有效解决了细胞爬片细胞易脱落、批间差异大、工作量繁杂、准确性低的问题。细胞芯片是目前基因芯片、蛋白芯片、组织芯片的有力补充。解决了细胞水平高通量、高效检测的困境。
实验流程
- 1.细胞包埋
- 2.细胞蜡块取点
- 3.细胞点融合
- 4.细胞芯片蜡块制作
实验步骤
步骤1:细胞包埋
取1×10⁷细胞经4%多聚甲醛固定,用3%低熔点琼脂糖(40℃)包裹成2mm³凝胶块
步骤2:蜡块取点
使用组织芯片仪(如Beecher MTA-1)以0.6mm针头阵列取样,间距1.2mm
步骤3:点阵融合
受体蜡块预热至58℃,将细胞点阵列压入并保持45分钟融合
步骤4:蜡块抛光
-20℃冷冻30分钟后,用精密切片机修整表面至平整(粗糙度<10μm)
案例与结果展示
送样运输要求
- 细胞数量:≥1×10⁷个(离心后沉淀体积≥100μL)
- 固定规范:4%多聚甲醛(含1mM EDTA)固定24小时
- 运输包装:防震EP管+生物危害标识,常温避光运输
- 特殊要求:贴壁细胞需用细胞刮刀收集,禁用胰酶消化
注意事项
- 琼脂糖浓度需严格控制在3%-4%,浓度过高阻碍细胞点融合
- 受体蜡块温度需稳定在58±1℃,温度过低导致阵列移位
- 每批次需设置对照点阵(未处理细胞+阳性凋亡细胞)
- 蜡块储存需密封避光,相对湿度≤30%防止吸潮变形