服务项目
细胞石蜡包埋
服务概述
细胞石蜡包埋技术通过琼脂糖预包埋固定细胞沉淀，形成稳定三维结构后进行石蜡包埋。该方法可有效防止微量细胞在脱水过程中丢失，适用于循环肿瘤细胞(CTC)、骨髓穿刺液等微量样本的病理分析，兼容HE染色、免疫组化及FISH检测。
服务周期：
技术介绍
细胞石蜡包埋技术通过琼脂糖预包埋固定细胞沉淀，形成稳定三维结构后进行石蜡包埋。该方法可有效防止微量细胞在脱水过程中丢失，适用于循环肿瘤细胞(CTC)、骨髓穿刺液等微量样本的病理分析，兼容HE染色、免疫组化及FISH检测。
实验流程
- 1.配制琼脂糖溶液
- 2.细胞悬浮液离心去上清留沉淀
- 3.细胞沉淀液态琼脂糖充分包裹
- 4.包裹后的细胞琼脂糖冷却成块
- 5.包裹细胞的琼脂块正常脱水包埋
实验步骤
步骤1：琼脂糖溶液配制
配制4%琼脂糖溶液（1g琼脂糖+25mL PBS），微波加热至完全溶解，冷却至45℃备用。
步骤2：细胞沉淀制备
细胞悬液经1000g离心10分钟，弃上清保留可见沉淀（≥1mm³），PBS漂洗3次。
步骤3：琼脂包裹
将沉淀转移至EP管，加入45℃琼脂糖溶液（琼脂:细胞=3:1），用移液枪吹打均匀。
步骤4：冷却固化
室温静置30分钟或4℃冷却10分钟，形成直径3-5mm的凝胶块。
步骤5：脱水包埋
梯度乙醇脱水（70%→100%，每级1小时）→二甲苯透明→60℃石蜡浸渍2小时。
案例:实验结果展示
送样运输要求
- 样本规格：离心后细胞沉淀需肉眼可见（≥1mm³）
- 固定要求：4%多聚甲醛固定24小时（固定液:样本=10:1）
- 运输包装：防漏离心管+缓冲泡沫，常温避光运输
- 禁忌：禁止冷冻（导致细胞膜破裂）、禁止使用EDTA抗凝管
注意事项
- 琼脂温度需严格控制在45-50℃，温度过低会导致包裹不均
- 细胞沉淀需充分重悬，避免聚集影响后续切片质量
- 脱水梯度需逐步递增，乙醇浓度骤变会引起细胞收缩变形
- 包埋方向需标记，确保切片面垂直于细胞层