服务项目
未脱钙骨硬组织包埋
服务概述
本方法针对未脱钙的骨组织,利用MMA(即甲基丙烯酸甲酯)包埋骨组织。采用莱卡硬组织切片机配合钨钢刀片对塑料包埋的骨组织、牙齿等进行切片。然后对骨组织切片进行脱塑及后续特殊染色,用于观察新骨形成、骨组织酶的组织化学检测、医学软硬组织疾病的检测评价等。
服务周期:
技术介绍
本方法针对未脱钙的骨组织,利用MMA(即甲基丙烯酸甲酯)包埋骨组织。采用莱卡硬组织切片机配合钨钢刀片对塑料包埋的骨组织、牙齿等进行切片。然后对骨组织切片进行脱塑及后续特殊染色,用于观察新骨形成、骨组织酶的组织化学检测、医学软硬组织疾病的检测评价等。
实验流程
- 70%乙醇固定(含1%醋酸钙)
- 梯度乙醇脱水(70%→100%)
- 二甲苯透明
- MMA树脂梯度浸塑
- 包埋剂聚合
实验步骤
步骤1:组织固定
取新鲜骨样本立即浸入70%乙醇+1%醋酸钙固定液中,4℃固定7天(每2天更换固定液)。
步骤2:梯度脱水
80%乙醇(24h)→90%乙醇(24h)→100%乙醇(24h×2次),全程4℃避光。
步骤3:MMA浸塑
乙醇:MMA=3:1(24h)→1:1(24h)→纯MMA(含0.5%过氧化苯甲酰,72h),37℃震荡浸渍。
步骤4:包埋聚合
将样本转移至硅胶模具,注入含催化剂MMA混合液,37℃聚合5天→45℃硬化24h。
案例:实验结果展示
送样运输要求
- 样本规格:长骨需<5cm,松质骨样本厚度<3mm
- 固定要求:70%乙醇+1%醋酸钙(体积比20:1)4℃保存
- 运输规范:防震泡沫箱+固定液浸没,生物危害标识,常温运输
- 禁忌:禁止冷冻(会导致骨小梁微裂纹)、禁止福尔马林固定(影响MMA聚合)
注意事项
- MMA具有挥发性,需在通风橱操作并佩戴防毒面具
- 脱水透明每阶段需完全(乙醇浑浊说明水分残留)
- 切片时使用钨钢刀(刀角15°),进刀速度≤1mm/s
- 脱塑处理:切片浸入丙酮24小时去除树脂后再染色