服务项目

未脱钙骨硬组织包埋

服务概述

本方法针对未脱钙的骨组织,利用MMA(即甲基丙烯酸甲酯)包埋骨组织。采用莱卡硬组织切片机配合钨钢刀片对塑料包埋的骨组织、牙齿等进行切片。然后对骨组织切片进行脱塑及后续特殊染色,用于观察新骨形成、骨组织酶的组织化学检测、医学软硬组织疾病的检测评价等。

服务周期:

技术介绍

本方法针对未脱钙的骨组织,利用MMA(即甲基丙烯酸甲酯)包埋骨组织。采用莱卡硬组织切片机配合钨钢刀片对塑料包埋的骨组织、牙齿等进行切片。然后对骨组织切片进行脱塑及后续特殊染色,用于观察新骨形成、骨组织酶的组织化学检测、医学软硬组织疾病的检测评价等。

实验流程

  1. 70%乙醇固定(含1%醋酸钙)
  2. 梯度乙醇脱水(70%→100%)
  3. 二甲苯透明
  4. MMA树脂梯度浸塑
  5. 包埋剂聚合

实验步骤

步骤1:组织固定

取新鲜骨样本立即浸入70%乙醇+1%醋酸钙固定液中,4℃固定7天(每2天更换固定液)。

步骤2:梯度脱水

80%乙醇(24h)→90%乙醇(24h)→100%乙醇(24h×2次),全程4℃避光。

步骤3:MMA浸塑

乙醇:MMA=3:1(24h)→1:1(24h)→纯MMA(含0.5%过氧化苯甲酰,72h),37℃震荡浸渍。

步骤4:包埋聚合

将样本转移至硅胶模具,注入含催化剂MMA混合液,37℃聚合5天→45℃硬化24h。

案例:实验结果展示

送样运输要求

  • 样本规格:长骨需<5cm,松质骨样本厚度<3mm
  • 固定要求:70%乙醇+1%醋酸钙(体积比20:1)4℃保存
  • 运输规范:防震泡沫箱+固定液浸没,生物危害标识,常温运输
  • 禁忌:禁止冷冻(会导致骨小梁微裂纹)、禁止福尔马林固定(影响MMA聚合)

注意事项

  • MMA具有挥发性,需在通风橱操作并佩戴防毒面具
  • 脱水透明每阶段需完全(乙醇浑浊说明水分残留)
  • 切片时使用钨钢刀(刀角15°),进刀速度≤1mm/s
  • 脱塑处理:切片浸入丙酮24小时去除树脂后再染色