服务项目
琼脂包埋
服务概述
细胞沉淀、花粉花药、3D培养的类器官等细小组织需要经过琼脂糖包裹成块后再进行常规的组织脱水包埋。
服务周期：
1-2周
技术介绍
细胞沉淀、花粉花药、3D培养的类器官等细小组织需要经过琼脂糖包裹成块后再进行常规的组织脱水包埋。
实验流程与步骤
1. 配制琼脂糖溶液 使用4-5%琼脂糖溶液（1g琼脂糖溶于25mL PBS），微波炉加热至完全溶解后冷却至45-55℃备用。
2. 组织离心取沉淀 细胞或类器官样本经1000g离心5分钟，弃上清保留绿豆大小沉淀，PBS漂洗3次。
3. 液态琼脂糖包裹 将沉淀转移至EP管，加入预冷至45℃的琼脂糖溶液，用镊子轻柔搅拌使样本完全悬浮。
4. 琼脂糖冷却成块 室温静置30分钟凝固，或4℃加速冷却10分钟，确保琼脂块无裂缝或气泡。
5. 脱水与包埋 琼脂块依次经梯度乙醇脱水（30%→100%）、二甲苯透明，最后浸蜡包埋（60℃石蜡浸泡2小时）。
送样运输要求
- 固定要求：样本需用4%多聚甲醛固定24小时，离心后沉淀成团（肉眼可见）。
- 包装规范：固定液需浸没样本，使用防漏塑料管（禁用玻璃容器），常温避光运输。
- 特殊样本：自发光样本需铝箔包裹，干冰运输时标注“勿冻结”。
注意事项
- 温度控制：琼脂糖溶液需保持45-55℃，温度过低会提前凝固导致包裹不均。
- 气泡处理：灌胶时沿管壁缓慢倒入，凝固前用针头挑破表面气泡。
- 污染预防：EP管和镊子需高压灭菌，避免核酸酶污染导致DNA降解。
- 浓度校准：琼脂糖浓度误差需≤0.2%，过高导致渗透性差，过低则结构松散。