服务项目
DAB加强法普鲁士蓝染色
服务概述
组织中的三价铁可以与亚铁氰化钾形成蓝色的亚铁氰化钾沉淀而显示出组织中的高含量铁元素，当组织中的铁元素含量极少时，该染色不能显示出蓝色定位铁元素，后续加入DAB，使DAB与沉淀态的三价铁发生氧化还原反应形成棕色化合物，增强了检测的特异性，可显示出组织中的微量铁元素。
服务周期：
技术介绍
组织中的三价铁可以与亚铁氰化钾形成蓝色的亚铁氰化钾沉淀而显示出组织中的高含量铁元素，当组织中的铁元素含量极少时，该染色不能显示出蓝色定位铁元素，后续加入DAB，使DAB与沉淀态的三价铁发生氧化还原反应形成棕色化合物，增强了检测的特异性，可显示出组织中的微量铁元素。
实验流程
- 脱蜡至水
- 普鲁士蓝染色
- DAB显色
- 苏木素染色
- 脱水
- 封片
实验步骤
- 脱蜡至水：
- ① 二甲苯脱蜡3次（每次10分钟）
- ② 梯度酒精（100%→80%）水化各5分钟
- ③ 蒸馏水冲洗2次（每次2分钟）
- 普鲁士蓝染色：
- ① 新鲜配制2%亚铁氰化钾与2%盐酸（1:1）混合液
- ② 37℃避光孵育30分钟，蒸馏水冲洗
- DAB显色：
- ① DAB工作液（0.05% DAB + 0.03% H₂O₂）覆盖组织
- ② 显微镜控制显色1-3分钟
- ③ 流水终止反应
- 苏木素染色：
- ① Mayer苏木素复染1分钟
- ② 1%盐酸酒精分化后流水返蓝10分钟
- 脱水封片：
- ① 梯度酒精脱水（80%→100%）
- ② 二甲苯透明，中性树胶封固
案例：实验结果展示
结果判读
组织中含有铁元素的部位呈棕褐色（DAB显色），细胞核呈浅蓝色（苏木素复染）
送样运输要求
- 样本需在20倍体积固定液中固定＞24小时（4%中性甲醛）
- 石蜡切片常温运输，冰冻切片需-20℃干冰运输
- 禁止：固定超过7天/反复冻融/冷冻结冰
注意事项
- DAB显色需在通风橱操作（致癌物）
- 亚铁氰化钾溶液需现用现配
- 苏木素复染后需充分返蓝
- 阳性对照建议使用肝硬化组织