服务项目
ATP染色
服务概述
三磷酸腺苷酶水解三磷酸腺苷和磷酸，并放出能量。磷酸和钠离子结合，在酶活性处形成无色的磷酸钙，磷酸钙经氯化钴处理形成磷酸钴，再经硫化铵处理形成棕黑色的硫化钴沉淀在酶活性部位。用碱作前孵育处理时，仅白肌纤维出现阳性反应，这对肌球蛋白ATP酶来说是特异性的
服务周期：
技术介绍
三磷酸腺苷酶水解三磷酸腺苷和磷酸，并释放能量。磷酸与钠离子结合形成无色的磷酸钙，经氯化钴处理转化为磷酸钴，再通过硫化铵形成棕黑色硫化钴沉淀于酶活性部位。经碱预处理时，该反应对肌球蛋白ATP酶具有特异性，仅白肌纤维显色。
实验流程
冰冻切片入水→ATP染色→脱水封片→显微镜镜检
实验步骤：
1. 样本处理：新鲜组织冰冻切片自然晾干，组化笔标记组织区域→pH10.4孵育液覆盖5min（不水洗）→pH9.4孵育液覆盖30min（加盖室温反应）
2. 钙离子处理：3×CaCl₂溶液浸洗（2min/次）
3. 硝酸钴显色：硝酸钴溶液浸染5min→5×自来水漂洗（20s/次）
4. 硫化处理：现配1%硫化铵溶液（5ml超纯水+1滴原液）浸染30s→3×自来水漂洗（20s/次）
5. 脱水封片：无水乙醇Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ各5min→二甲苯透明5min→中性树胶封固
6. 镜检分析：显微镜观察并采集图像（40×物镜）
案例：实验结果展示
结果判读：
Ⅰ型肌纤维（慢缩肌）呈浅灰色/无色，Ⅱ型肌纤维（快缩肌）呈深灰色/黑色。正常肌肉组织Ⅰ/Ⅱ型纤维比例约为1:2。
送样运输要求：
1. 新鲜组织需干冰速冻后-80℃运输（避免反复冻融）
运输容器需标注"生物危险品"
运输容器需标注"生物危险品"
2. 冰冻切片应密封包装后干冰运输
注意事项：
1. 必须使用新鲜组织制备冰冻切片（禁用固定处理）
2. 试剂保存：
• Tris碱、氯化钙：常温干燥保存
• 硫化铵：避光保存（≤25℃）
• ATP钠盐：-20℃密封保存
• 其他染液：4℃保存（使用前平衡至室温）
• Tris碱、氯化钙：常温干燥保存
• 硫化铵：避光保存（≤25℃）
• ATP钠盐：-20℃密封保存
• 其他染液：4℃保存（使用前平衡至室温）
3. 工作液现用现配：
• 孵育液配制后2h内使用
• 硫化铵稀释液需在10min内使用
• 孵育液配制后2h内使用
• 硫化铵稀释液需在10min内使用