服务项目

ALP碱性磷酸酶染色

服务概述

碱性磷酸酶染色,又称Alp染色,是用于检测骨细胞、骨组织、肾、肝碱性磷酸酶的染色方法,使碱性磷酸酶呈黑色,细胞核呈浅蓝色,这是成熟成骨细胞的标志性酶;也可用于肝炎和肾炎的检测。

服务周期:

技术介绍

碱性磷酸酶染色,又称ALP染色,是用于检测骨细胞、骨组织、肾、肝碱性磷酸酶的染色方法,使碱性磷酸酶呈黑色,细胞核呈浅蓝色,这是成熟成骨细胞的标志性酶;也可用于肝炎和肾炎的检测。

实验流程

1. 样本接收:石蜡切片、细胞爬片、冰冻切片
2. 实验步骤:脱蜡至水→染液配制→ALP染色→苏木素浅染核
3. 实验结果:染色好的玻片

实验步骤:

1. 脱蜡至水:石蜡切片经二甲苯Ⅰ/Ⅱ各15min→梯度乙醇(100%→95%→80%→70%)复水
2. 染液配制:现用现配ALP染液(含α-萘酚磷酸钠盐1mg/ml,固蓝B盐0.2mg/ml,pH 9.4缓冲液)
3. ALP染色:37℃避光孵育30-60min(骨组织需延长至2h)
4. 核染色:苏木素浅染30秒→流水返蓝

案例:实验结果展示

结果判读:

阳性部位显示黑色颗粒状沉淀,骨组织成骨细胞膜强阳性,肝组织门静脉区弱阳性。每高倍镜视野>5个阳性细胞判定为有效染色。

送样运输要求:

1. 新鲜组织需立即置于4%多聚甲醛固定(组织厚度≤3mm)
固定时间:骨组织24-48h,软组织12-24h
2. 冰冻切片需-80℃干冰运输,石蜡切片常温避光运输

注意事项:

1. ALP染液必须现配现用(配制后30分钟内使用)
2. 切片水洗必须使用超纯水(普通蒸馏水会导致背景沉淀)
3. 染色温度严格控制在37±0.5℃(温度波动影响酶活性)