服务项目
骨组织脱钙（慢脱）
服务概述
骨组织是坚硬的结缔组织，由细胞、纤维、基质组成。骨的最大特点是细胞基质含有大量沉积性钙盐，以构成身体的骨骼系统。由于骨组织质地坚硬，必须要进行脱钙，擦能进行常规病理石蜡制片。本项目采用经典的EDTA螯合剂对骨组织进行脱钙，对抗原破坏程度小，脱钙周期因骨组织大小不同。
技术介绍
骨组织是坚硬的结缔组织，由细胞、纤维、基质组成。骨的最大特点是细胞基质含有大量沉积性钙盐，以构成身体的骨骼系统。由于骨组织质地坚硬，必须要进行脱钙，才能进行常规病理石蜡制片。本项目采用经典的EDTA螯合剂对骨组织进行脱钙，对抗原破坏程度小，脱钙周期因骨组织大小不同。
实验流程
骨组织取材-脱钙-脱水-透明-石蜡包埋-切片
实验步骤
1. 取材：将打印好标签与组织一一对应放在有孔的PE管或包埋框中，放入桶中倒满EDTA脱钙液，密封后置于恒温摇床中脱钙。脱钙液每2-3天更换一次。
2. 脱钙：脱钙小桶置于恒温摇床（25-30℃），转速110-120RPM。每两天观察脱钙程度，当针可刺入组织时，用莱卡刀片剖开组织以加速软化。
3. 脱水浸蜡：软化后的骨组织流水冲洗后，按梯度酒精脱水（75%酒精2h→85%酒精2h→90%酒精1.5h→95%酒精2h→无水乙醇I/II各2h→醇苯40min→二甲苯I/II各40min→65℃石蜡I 0.5h→石蜡II 1h→石蜡III 2h45min）。
4. 包埋：脱水后的组织在包埋机中包埋，熔蜡凝固前将组织按包埋面要求放入包埋框并贴标。-20°冻台冷却后修整蜡块。
5. 切片：修整蜡块用石蜡切片机切4μm厚片，摊片机40℃温水展平，载玻片捞片后60℃烘箱烤片，常温保存备用。
案例：实验结果展示
送样运输要求
1. 样本放置于20倍体积固定液中固定24h以上，常温运输送样。
2. 切勿固定时间过长，切勿冷冻结冰。
注意事项
① EDTA脱钙液需保持pH 7.0-7.4以维持活性；② 脱钙时间可能需数周至数月，需定期检测钙残留；③ 脱水过程中避免剧烈震荡以防骨小梁断裂；④ 包埋前需彻底清除残留脱钙液；⑤ 切片后需检查骨组织结构完整性；⑥ 大体积骨样本建议预切割以缩短脱钙周期。