服务项目

骨组织脱钙(快脱)

服务概述

骨组织是坚硬的结缔组织,由细胞、纤维、基质组成。骨的最大特点是细胞基质含有大量沉积性钙盐,以构成身体的骨骼系统。由于骨组织质地坚硬,必须要进行脱钙,才能进行常规病理石蜡制片。本项目采用混合酸对骨组织进行脱钙,脱钙时间短,但是对组织细胞核染色及抗原会有一定的影响。

服务周期:

技术介绍

骨组织是坚硬的结缔组织,由细胞、纤维、基质组成。骨的最大特点是细胞基质含有大量沉积性钙盐,以构成身体的骨骼系统。由于骨组织质地坚硬,必须要进行脱钙,才能进行常规病理石蜡制片。本项目采用混合酸对骨组织进行脱钙,脱钙时间短,但是对组织细胞核染色及抗原会有一定的影响。

实验流程

骨组织取材-脱钙-脱水-透明-石蜡包埋-切片

实验步骤

1. 取材:将打印好标签与组织一一对应放在有孔的PE管或包埋框中,放入桶中倒满新型脱钙液,密封后置于恒温摇床中脱钙。脱钙液每2-3天更换一次。

2. 脱钙:脱钙小桶置于恒温摇床(25-30℃),转速110-120RPM。每两天观察脱钙程度,当针可刺入组织时,用莱卡刀片剖开组织以加速软化。

3. 脱水浸蜡:软化后的骨组织流水冲洗后,按梯度酒精脱水(75%酒精2h→85%酒精2h→90%酒精1.5h→95%酒精2h→无水乙醇I/II各2h→醇苯40min→二甲苯I/II各40min→65℃石蜡I 0.5h→石蜡II 1h→石蜡III 2h45min)。

4. 包埋:脱水后的组织在包埋机中包埋,熔蜡凝固前将组织按包埋面要求放入包埋框并贴标。-20°冻台冷却后修整蜡块。

5. 切片:修整蜡块用石蜡切片机切4μm厚片,摊片机40℃温水展平,载玻片捞片后60℃烘箱烤片,常温保存备用。

案例:实验结果展示

送样运输要求

1. 样本放置于20倍体积固定液中固定24h以上,常温运输送样。

2. 切勿固定时间过长,切勿冷冻结冰。

注意事项

① 脱钙液需定期更换以保证效率;② 恒温摇床温度严格控制在25-30℃;③ 骨组织剖开时需避免损伤样本结构;④ 脱水梯度时间需精确控制以防组织脆化;⑤ 包埋后蜡块需充分冷却再修整;⑥ 切片厚度需均匀以保证染色质量。