服务项目

植物硬组织切片

服务概述

采用莱卡全自动轮转式切片机,配合钨钢刀片,对MMA包埋的较硬的木质化程度高的植物组织进行切片。植物组织无需化学试剂软化,避免木质部结构被化学试剂破坏,保留木质部结构。

服务周期:
技术介绍

采用莱卡全自动轮转式切片机,配合钨钢刀片,对MMA包埋的较硬的木质化程度高的植物组织进行切片。植物组织无需化学试剂软化,避免木质部结构被化学试剂破坏,保留木质部结构。

实验流程

组织固定 - 脱水 - 透明 - 浸塑 - 包埋 - 切片

实验步骤:
  1. 组织固定:将植物样本完全浸没于FAA固定液中(福尔马林:冰醋酸:70%乙醇=5:5:90),固定24小时以上。
  2. 脱水与透明:依次经70%乙醇→85%乙醇→95%乙醇→无水乙醇梯度脱水,每级2小时;再以乙醇:二甲苯=1:1混合液透明处理1小时。
  3. MMA浸塑:将样本转移至MMA单体(甲基丙烯酸甲酯)中浸塑,37℃温箱渗透3天,期间更换2次MMA溶液。
  4. 包埋:将浸塑后样本置于包埋模具中,加入含1%过氧化苯甲酰的MMA单体,60℃聚合48小时形成硬块。
  5. 切片:将包埋块修整后固定于切片机,使用钨钢刀片切取10-50μm厚切片,蒸馏水展片,40℃烘干。
案例:实验结果展示
结果判读:

合格切片应满足:① MMA包埋块无气泡开裂;② 切片厚度均匀,木质部导管结构完整可见;③ 染色后细胞壁呈亮蓝色(甲苯胺蓝染色),髓射线清晰连续。

送样运输要求:
  • 植物样本置于20倍样本体积的FAA固定液中固定24h以上,常温运输送样。
  • 切勿冷冻结冰。
注意事项:
  • MMA操作:需在通风橱中进行,避免吸入单体蒸汽;聚合时确保温箱温度稳定±1℃
  • 刀片维护:钨钢刀片每切5个样本需用毛刷清理碎屑,定期用石蜡油防锈
  • 样本处理:木质化样本需先去除表皮角质层,确保MMA充分渗透
  • 安全防护:操作FAA固定液需戴N95口罩及护目镜