服务项目

拍照(油镜)

服务概述

实验中最常用的是普通光学显微镜的油镜。油镜镜头透镜小,因此进入镜筒的光线极少。为了增加亮度,须在标本片与镜头之间滴加香柏油。因为香柏油的折光率与玻片很接近,可以尽量避免通过聚光器进入玻片的光线因折射而丢失,从而使得视野中的物像更加清晰。   正置显微镜型号:NIKON Eclipse ci;软件:NIS_F_Ver43000_64bit_E;成像系统:NIKON digital sight DS-FI2。1000×放大倍数。

服务周期:

油镜显微成像技术介绍

基于NIKON Eclipse ci系统,采用100×油镜(NA 1.25,WD 0.13mm)进行亚微米级成像。通过香柏油(折射率n=1.518)消除空气-玻片界面折射(折射率差Δn=0.51),提升分辨率至0.2μm。配备高灵敏度DS-FI2 CCD(量子效率>75%@560nm),支持活细胞动态观察。

实验流程

  1. 样本处理:接收厚度≤5μm切片→二甲苯脱蜡→梯度乙醇水化
  2. 浸油操作:滴加1滴香柏油(粘度150cSt)→避免气泡产生(操作温度20-25℃)
  3. 图像采集:汞灯强度50%→曝光时间自动优化(动态范围12bit)→6视野1000×成像
  4. 清洁维护:镜油专用清洁剂(70%乙醚+30%乙醇)擦拭物镜

案例展示

  • 骨髓涂片1000×:中性粒细胞分叶核与血小板形态解析
  • 植物细胞1000×:叶绿体基粒垛叠结构观察
  • 肿瘤细胞IHC 1000×:HER2膜阳性信号半定量分析
  • 寄生虫虫体1000×:吸盘结构与体表纤毛分布检测

结果判读

成像特征:

  • 细胞核染色质分布(异型性评分≥3分提示恶性)
  • 病原微生物形态鉴别(如疟原虫环状体直径1.5-2μm)
  • IHC膜/浆/核定位判断(阳性信号占比>10%为有效)

送样运输要求

  • 载玻片需硅烷化处理(防脱片)
  • 专用切片盒内填充缓冲海绵(抗震等级G≥50)
  • 环境温度15-30℃,湿度40-60%RH

注意事项

  • 油镜工作距离仅0.13mm,严禁触碰样本
  • TIFF格式保留16位深(灰度值范围0-4095)
  • 标尺校准误差±0.5%(基于NIST标准微标尺)
  • 默认采集肝窦内皮细胞窗孔结构(孔径100-150nm)
  • 浸油污染需立即清理(残留时间<2小时)