服务项目

拍照(偏振光)

服务概述

正置显微镜型号:NIKON Eclipse ci;软件:NIS_F_Ver43000_64bit_E;成像系统:NIKON digital sight DS-FI2。可选择 20×、40×、100×、200×和400×不同放大倍数。偏振光拍照是利用光的偏振特性对具有双折射性物质进行拍照采集图像。 在生物体中,不同的纤维蛋白结构显示出明显的各向异性,使用偏光显微镜可得到这些纤维中分子排列的详细情况,如胶原蛋白等。双折射性是晶体的基本特征,因此也被广泛应用在结石、尿酸晶体等。淀粉样蛋白的生化成分和来源不尽相同,但在染色和某些物理性状方面具有许多共同性,可被刚果红染成砖红色,偏振光下呈特有的绿色双折光。下图就是利用偏振光显微镜拍摄的天狼猩红染色结果。

服务周期:

偏振光显微成像技术介绍

基于NIKON Eclipse ci偏振光系统(配备λ补偿器与检偏器),通过检测样本双折射特性(如胶原纤维I/III型比例、淀粉样蛋白结晶),实现各向异性物质的可视化分析。天狼星红染色样本在偏振光下可区分胶原类型(红色:I型;绿色:III型),刚果红染色淀粉样蛋白呈现特征性苹果绿双折光(波长差530nm)。

实验流程

  1. 样本接收:接收天狼星红/刚果红染色切片(厚度5-8μm),载玻片厚度1.0-1.2mm
  2. 光路校准:调节起偏器与检偏器正交(90°交叉),插入λ补偿器增强对比度
  3. 图像采集:20×物镜(NA 0.45)扫描全景→100×油镜(NA 1.25)解析亚纤维结构
  4. 数据分析:NIS-Elements D 5.30软件进行双折射强度量化(灰度值0-4095)

案例展示

结果判读

送样运输要求

  • 切片盒内需填充缓冲棉,防止载玻片碎裂
  • 刚果红染色样本需避光运输(铝箔纸包裹载玻片)
  • 冰冻切片需标注保存温度(-20℃干冰运输)

注意事项

  • 40×物镜需配置应变消减型透镜(消除自身双折射干扰)
  • TIFF格式保留16位原始数据(包含偏振角信息)
  • 标尺添加需基于物镜校准(100×物镜1μm=15像素)
  • 建议提供同视野明场图像用于对照分析