服务项目
拍照(高尔基 )
服务概述
Golgi-Cox浸染法是研究神经元和胶质细胞正常和非正常形态最有效的方法之一。使用Golgi技术,在药物处理过的动物脑中和因神经疾病死亡的病人脑中发现了神经树突和树突微小的形态改变。 应用尼康厚组织成像软件,可以将不同层面的神经细胞分支形态合成清晰的平面图,以便的观察神经元状态及统计树突棘的数量变化。
服务周期:
技术介绍
技术原理:基于Golgi-Cox浸染法,通过硝酸银-汞盐复合物选择性沉积于神经元胞体及树突,结合NIKON NIS-Elements AR 3D分析模块(Z-step 0.5μm),实现200μm厚脑组织切片的全层扫描与景深融合,解析树突棘(spine density ≥1.2/μm)的微形态学变化。
实验流程
- 样本处理:300μm厚脑切片→4%多聚甲醛+2.5%重铬酸钾避光浸染6周→1%硝酸银后固定48h
- 成像参数:CFI Plan Fluor 100×油镜(NA 1.30),Z轴步进0.8μm,DIC微分干涉对比成像
- 图像采集:自动拍摄50-80个焦平面→NIS-Elements景深扩展(Extended Depth of Focus)合成
- 数据输出:TIFF格式保留16bit色深(动态范围0-4095),元数据包含三维坐标信息
案例展示
结果判读
送样运输要求
- 专用避光运输盒(内衬黑色海绵,湿度<30%)
- 载玻片需硅化处理(防止银颗粒脱落)
- 温度控制:4-10℃冷链运输(冰袋不可直接接触玻片)
注意事项
- 100×油镜成像需使用高折射率浸油(n=1.518,温度系数0.0005/℃)
- TIFF格式保留完整元数据(含Z轴层数/曝光参数)
- 标尺添加需基于物镜校准文件(误差±1%)
- 默认输出1440×1024分辨率(像素尺寸0.065μm@100×)
- 建议提供Neurolucida兼容格式(用于三维重建)