服务项目
尼罗红染色(动物标本)
服务概述
尼罗红是一种亲脂性的荧光染料,通过与脂类物质(腊酯、三酰甘油以及各种脂肪酸)结合后发出荧光检测信号,快速、敏感、可靠地检测出标本中的脂类成分,在荧光显微镜(或共聚焦显微镜)下呈现桔红色或者红色。
服务周期:
技术介绍
尼罗红是一种亲脂性的荧光染料,通过与脂类物质(腊酯、三酰甘油以及各种脂肪酸)结合后发出荧光检测信号,快速、敏感、可靠地检测出标本中的脂类成分,在荧光显微镜(或共聚焦显微镜)下呈现桔红色或者红色。
实验流程
1. 组织经脂肪固定液固定24h以上,进行冰冻切片,切片自然晾干。
2. 将尼罗红储存液放置常温下复温,染色前配制尼罗红染色液,混匀。
3. 用组化笔画圈,滴加染色液于组织上,避光染色10min。
4. 倾去切片上的染色液,PBS浸洗(轻洗几秒),蒸馏水2缸浸洗(每次轻洗几秒)。
5. 切片稍甩干,滴加DAPI染液,避光染色8min,倾去切片上的染色液,蒸馏水3缸浸洗(每次轻洗几秒)。
6. 滤纸稍吸干周围多余的蒸馏水,抗荧光淬灭封片剂封片,避光,4℃暂存。
7. 荧光显微镜或者共聚焦显微镜成像,保存结果。
实验步骤
案例:实验结果展示
结果判读
送样运输要求
1. 冰冻切片﹣20℃储存和运输。
2. 动物标本尼罗红染色,只能做冰冻切片,不能做石蜡切片。
注意事项
① 尼罗红染色液需避光配制并立即使用;② PBS和蒸馏水浸洗动作需轻柔避免组织脱落;③ DAPI染色与尼罗红染色需严格避光操作;④ 封片后样本需在24小时内完成成像;⑤ 冰冻切片运输需全程﹣20℃冷冻链保护。