服务项目

免疫荧光(单标,组织芯片)

服务概述

组织芯片免疫荧光染色,是将许多不同处理的组织以规则的微阵列方式排列于同一载体上,同时进行相同指标的免疫荧光检测。

服务周期:

技术介绍

组织芯片免疫荧光染色,是将许多不同处理的组织以规则的微阵列方式排列于同一载体上,同时进行相同指标的免疫荧光检测。

实验流程

  1. 石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ15min→二甲苯Ⅱ15min→无水乙醇Ⅰ5min→无水乙醇Ⅱ5min→85%酒精5min→75%酒精5min→蒸馏水洗
  2. 抗原修复
    • EDTA抗原修复缓冲液(PH9.0)微波修复(中火至沸→间隔10min→中低火至沸)
    • 自然冷却后PBS(PH7.4)洗涤3次,每次5min
    • ※ 修复条件需根据组织类型调整
  3. 一抗孵育:滴加一抗工作液,湿盒4℃孵育过夜

    ※ 湿盒内需保持湿度防止抗体蒸发

  4. 二抗孵育:避光室温孵育50min→PBS洗涤3次
  5. DAPI复染:避光染核10min→PBS洗涤
  6. 封片镜检:抗淬灭封片剂封片→倒置荧光显微镜采集图像

案例:实验结果展示

送样运输要求

  • 新鲜组织样本需4%多聚甲醛固定>24h,常温运输
  • 石蜡切片常温防潮运输
  • ※ 冰冻切片需干冰维持-20℃运输

注意事项

  • 抗原修复时需实时观察液面,防止修复液蒸干
  • 二抗孵育需严格避光操作
  • 同批次实验需统一显微镜曝光参数