服务项目
免疫荧光(单标,组织芯片)
服务概述
组织芯片免疫荧光染色,是将许多不同处理的组织以规则的微阵列方式排列于同一载体上,同时进行相同指标的免疫荧光检测。
服务周期:
技术介绍
组织芯片免疫荧光染色,是将许多不同处理的组织以规则的微阵列方式排列于同一载体上,同时进行相同指标的免疫荧光检测。
实验流程
- 石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ15min→二甲苯Ⅱ15min→无水乙醇Ⅰ5min→无水乙醇Ⅱ5min→85%酒精5min→75%酒精5min→蒸馏水洗
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抗原修复:
- EDTA抗原修复缓冲液(PH9.0)微波修复(中火至沸→间隔10min→中低火至沸)
- 自然冷却后PBS(PH7.4)洗涤3次,每次5min
- ※ 修复条件需根据组织类型调整
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一抗孵育:滴加一抗工作液,湿盒4℃孵育过夜
※ 湿盒内需保持湿度防止抗体蒸发
- 二抗孵育:避光室温孵育50min→PBS洗涤3次
- DAPI复染:避光染核10min→PBS洗涤
- 封片镜检:抗淬灭封片剂封片→倒置荧光显微镜采集图像
案例:实验结果展示
送样运输要求
- 新鲜组织样本需4%多聚甲醛固定>24h,常温运输
- 石蜡切片常温防潮运输
- ※ 冰冻切片需干冰维持-20℃运输
注意事项
- 抗原修复时需实时观察液面,防止修复液蒸干
- 二抗孵育需严格避光操作
- 同批次实验需统一显微镜曝光参数