服务项目

ROS荧光染色

服务概述

二氢乙锭(Dihydroethidium, DHE),可自由透过活细胞进入细胞内,并被细胞内的ROS氧化,形成氧化乙锭;氧化乙锭可掺入染色体DNA中,产生红色荧光。根据活细胞中红色荧光的产生,可以判断细胞ROS含量的多少和变化。

服务周期:

ROS荧光染色

技术介绍

二氢乙锭(Dihydroethidium, DHE)可自由透过活细胞进入细胞内,并被细胞内的ROS氧化形成氧化乙锭;氧化乙锭可掺入染色体DNA中,产生红色荧光。根据活细胞中红色荧光的强度,可定量分析细胞内活性氧(ROS)水平的变化。

实验流程

  1. 组化笔画圈标记样本区域
  2. 滴加ROS染液(5μM DHE)覆盖样本
  3. 37℃避光孵育30分钟
  4. DAPI染核后抗淬灭封片
  5. 荧光显微镜镜检分析

案例:实验结果展示

结果判读

  • 阳性信号:胞质/核周红色荧光(激发535nm/发射610nm)
  • 定量标准:Image J测量平均荧光强度(MFI)

送样运输要求

  • 新鲜冰冻切片:干冰维持-20℃运输
  • ※ 避免反复冻融,需在采样后24小时内处理

注意事项

  • 染色全程避光操作,孵育时间不得超过45分钟;
  • DHE工作液需现用现配,-80℃分装保存≤6个月;
  • 需设置未处理样本作为阴性对照。