服务项目
ROS荧光染色
服务概述
二氢乙锭(Dihydroethidium, DHE),可自由透过活细胞进入细胞内,并被细胞内的ROS氧化,形成氧化乙锭;氧化乙锭可掺入染色体DNA中,产生红色荧光。根据活细胞中红色荧光的产生,可以判断细胞ROS含量的多少和变化。
服务周期:
ROS荧光染色
技术介绍
二氢乙锭(Dihydroethidium, DHE)可自由透过活细胞进入细胞内,并被细胞内的ROS氧化形成氧化乙锭;氧化乙锭可掺入染色体DNA中,产生红色荧光。根据活细胞中红色荧光的强度,可定量分析细胞内活性氧(ROS)水平的变化。
实验流程
- 组化笔画圈标记样本区域
- 滴加ROS染液(5μM DHE)覆盖样本
- 37℃避光孵育30分钟
- DAPI染核后抗淬灭封片
- 荧光显微镜镜检分析
案例:实验结果展示
结果判读
- 阳性信号:胞质/核周红色荧光(激发535nm/发射610nm)
- 定量标准:Image J测量平均荧光强度(MFI)
送样运输要求
- 新鲜冰冻切片:干冰维持-20℃运输
- ※ 避免反复冻融,需在采样后24小时内处理
注意事项
- 染色全程避光操作,孵育时间不得超过45分钟;
- DHE工作液需现用现配,-80℃分装保存≤6个月;
- 需设置未处理样本作为阴性对照。