服务项目

HE染色

服务概述

苏木精-伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。

服务周期:
4-8 周

1、技术介绍

苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-Eosin staining),简称HE染色法,是石蜡切片技术中最常用的染色方法。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。

2、实验流程

  

3、实验步骤

  1. 切片脱塑至水:依次将切片置于:
    • 乙二醇乙醚乙酸酯Ⅰ 6h(37℃)
    • 乙二醇乙醚乙酸酯Ⅱ过夜(37℃)
    • 乙二醇乙醚乙酸酯Ⅲ室温10-15min
    • 乙二醇乙醚乙酸酯Ⅳ室温10-15min
    • 梯度酒精脱水:100%Ⅰ乙醇→100%Ⅱ乙醇→95%→90%→80%各10min
    • 自来水洗
  2. 苏木素染色:切片入苏木素染液8-10min→自来水洗→分化液分化→返蓝液返蓝→流水冲洗
  3. 伊红染色:85%酒精→95%酒精各5min脱水→伊红染液染色8-10min
  4. 脱水封片:无水乙醇I/II/III各5min→二甲苯I/II各5min透明→中性树胶封片
  5. 镜检分析:显微镜观察并采集图像

案例:实验结果展示

  

(图示:小鼠肝脏组织HE染色,细胞核呈蓝色,细胞质呈粉红色)

4、送样运输要求

  • 样本需在>10倍体积固定液中固定24h以上
  • 常温运输,避免冷冻/反复冻融

5、注意事项

  • 严格控制细胞核分化时间(苏木素染色后分化不足会过深,过度会变浅)
  • 定期更换染液:苏木素使用2周/伊红使用1个月后需更换