服务项目
动物模型构建服务
拍照(油镜)
实验中最常用的是普通光学显微镜的油镜。油镜镜头透镜小,因此进入镜筒的光线极少。为了增加亮度,须在标本片与镜头之间滴加香柏油。因为香柏油的折光率与玻片很接近,可以尽量避免通过聚光器进入玻片的光线因折射而丢失,从而使得视野中的物像更加清晰。 正置显微镜型号:NIKON Eclipse ci;软件:NIS_F_Ver43000_64bit_E;成像系统:NIKON digital sight DS-FI2。1000×放大倍数。
拍照(荧光)
荧光显微镜是免疫荧光的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。正置显微镜型号:NIKON Eclipse ci;软件:NIS_F_Ver43000_64bit_E;成像系统:NIKON digital sight DS-FI2。可选择100×、200×和400×不同放大倍数。共配置红、绿、蓝三个通道:DAPI(EX激发340-380,BA发射435-485);FITC(EX激发465-495,BA发射515-555);G-2A(EX激发510-560,BA发射590)
拍照(偏振光)
正置显微镜型号:NIKON Eclipse ci;软件:NIS_F_Ver43000_64bit_E;成像系统:NIKON digital sight DS-FI2。可选择 20×、40×、100×、200×和400×不同放大倍数。偏振光拍照是利用光的偏振特性对具有双折射性物质进行拍照采集图像。 在生物体中,不同的纤维蛋白结构显示出明显的各向异性,使用偏光显微镜可得到这些纤维中分子排列的详细情况,如胶原蛋白等。双折射性是晶体的基本特征,因此也被广泛应用在结石、尿酸晶体等。淀粉样蛋白的生化成分和来源不尽相同,但在染色和某些物理性状方面具有许多共同性,可被刚果红染成砖红色,偏振光下呈特有的绿色双折光。下图就是利用偏振光显微镜拍摄的天狼猩红染色结果。
拍照(高尔基 )
Golgi-Cox浸染法是研究神经元和胶质细胞正常和非正常形态最有效的方法之一。使用Golgi技术,在药物处理过的动物脑中和因神经疾病死亡的病人脑中发现了神经树突和树突微小的形态改变。 应用尼康厚组织成像软件,可以将不同层面的神经细胞分支形态合成清晰的平面图,以便的观察神经元状态及统计树突棘的数量变化。
拍照(白光)
普通光学显微镜用于生物研究,其作用主要是将观察的标本放大,连接CCD后可以将观察的视野保存图片形式,以便留存和分析。 正置显微镜型号:NIKON Eclipse ci;软件:NIS_F_Ver43000_64bit_E;成像系统:NIKON digital sight DS-FI2。可选择 20×、40×、100×、200×和400×不同放大倍数。
厚组织切片白光全景拍照
该项技术通过依次多层拍摄组织切片不同部位照片后通过软件无缝拼接合成出完整的全景图像。主要解决厚组织切片如骨磨片,骨硬组织切片,特殊大小的切片,较厚的载玻片且组织大无法在低倍下拍摄全景的问题。
测量分析
分析软件:Image-pro plus 6.0 (Media Cybernetics, Inc., Rockville, MD, USA);3D Histech Quant Center2.1 (3D Histech, Hungary);Halo2.32(Indica labs,USA)。 HE测量各类结构长、宽、面积、数量以及密度等常规数据。特殊染色主要主要分析阳性面积以及占比或视野内阳性细胞个数;部分特殊染色用来辅助HE进行评分或做进一步判断。
病理分析
显微镜下观察切片或电脑浏览扫描文件,对该切片常见的病理改变如炎症、坏死、变性、增生以及纤维化等情况文字描述,并反映出片子之间的差异。报告大致分为三种类型。 每张切片提供相应典型视野图片,描述病理变化,并在word文档中用不同颜色箭头标注不同典型病变特征。适用于分组较少,每组片子数量较少的客户,不需要评分或者无评分标准的客户。 每张切片进行不同病变方面病理评分(评分标准需提前提供,某些评分会需要提供相应特殊染色切片),按分组提供相应典型视野图片,描述该组主要病理变化,在word文档中用不同颜色箭头标注不同典型病变特征。适用于分组较多,每组片子较多的客户。 毒性病理报告。大批量动物不同器官组织切片病理观察并统计正常及病变动物的数量,总结药物对受试动物的毒性。可由兽医病理学博士、动物病理学家签字。
原位杂交(组织芯片)
原位杂交原理:原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。原位杂交亦可以应用于组织芯片的检测。结果更丰富,更具有对比性。
原位杂交(FISH双标)
原位杂交原理:原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。 原位杂交(FISH双标)可以检测两个靶基因的共定位情况。
原位杂交(FISH三标)
原位杂交原理:原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。实验采用三种标记不同荧光素的不同探针,同时检测一个样本。适用于各类细菌检测和其他基因检测。
原位杂交(FISH、IF双染)
原位杂交原理:原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。IF即免疫荧光,可检测组织或细胞中某蛋白的表达情况及定位。 原位杂交(FISH、IF双标)可以检测靶基因与靶蛋白的共定位情况。
原位杂交(FISH、FISH、IF三染)
原位杂交与免疫荧光原理:原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。免疫荧光就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体或抗原上,与其相应的抗原或抗体结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。 通过原位杂交双探针及免疫荧光进行三标,可以在组织细胞中对核酸分子和蛋白指标同时进行共定位、以及定性分析,可以用来从共定位角度提示核酸和蛋白存在相互作用。
原位杂交(BCIP/NBT)
原位杂交原理:原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。
DAB加强法普鲁士蓝染色
组织中的三价铁可以与亚铁氰化钾形成蓝色的亚铁氰化钾沉淀而显示出组织中的高含量铁元素,当组织中的铁元素含量极少时,该染色不能显示出蓝色定位铁元素,后续加入DAB,使DAB与沉淀态的三价铁发生氧化还原反应形成棕色化合物,增强了检测的特异性,可显示出组织中的微量铁元素。
ATP染色
三磷酸腺苷酶水解三磷酸腺苷和磷酸,并放出能量。磷酸和钠离子结合,在酶活性处形成无色的磷酸钙,磷酸钙经氯化钴处理形成磷酸钴,再经硫化铵处理形成棕黑色的硫化钴沉淀在酶活性部位。用碱作前孵育处理时,仅白肌纤维出现阳性反应,这对肌球蛋白ATP酶来说是特异性的
AgNOR染色
细胞核核仁组织区即参与形成核仁的染色质区,其含有酸性非组蛋白类蛋白质,对银有较高的亲和力。也称嗜银蛋白。这些AgNOR参与核糖体基因RNA的转录,与核糖体的形成和蛋白质的合成密切相关。其数量和形状反应细胞的增殖活性,可用以鉴别正常细胞核肿瘤细胞。
AB-PAS染色
AB-PAS染色,石蜡切片技术里常用的检测肠、胃中酸性和中性粘液物质的染色方法。组织中的糖原、中性粘液物质呈红色,酸性粘液物质呈蓝色,混合性粘液物质呈蓝紫色或紫蓝色。主要用于区分中性和酸性粘液,及二者的比率。有些癌细胞可以通过此染色方法进行区分属于什么性质的癌。
组织芯片切片
组织芯片是将许多不同个体组织标本以规则阵列方式排布于同一载玻片上,进行同一指标的原位组织学研究。客户提供供体组织或蜡块,在芯片制作过程中首先将供体组织包埋成供体蜡块,按照客户要求用取样针从供体蜡块上将目的区域的组织取出并按照客户要求将不同的组织点排列在事先制作好的受体蜡块上。然后将排列好的组织点与受体蜡块进行融合成一个蜡块再进行后续的切片。切出来的片子同一载玻片上包含了客户需要同时观察和对比的所有组织,这样的切片用于后续进行染色或免疫组化/荧光操作即可将载玻片上所有的组织点条件控制一致,这样比一个组织一张切片操作起来更方便快捷,组织间对比更明显结果更可靠。
振动切片
振动切片时刀片通过高频率振动将组织进行厚切片,切片厚度30-999um。可以切新鲜或经过固定的动植物样本,切片时组织标本不需要经过冷冻或者包埋,减少冰晶对组织的破坏,并且能保持样品活性和细胞良好形态。振动切片的主要应用:高尔基染色切片,嫩的组织或者软化之后组织切片间苯三酚染色,新鲜组织可以直接切片用来做组织培养。震动厚组织切片可以弥补石蜡切片或者冰冻切片等薄切片对组织内一些成份丰度的影响(如神经纤维等丰度,血管的丰度),结合本公司厚组织拍照软件或者切片的多层扫描可以更丰富地观察目的成分。
细胞爬片&滴片
细胞爬片通过原位固定染色实现细胞-载玻片一体化,适用于贴壁细胞分析;细胞滴片通过离心浓缩和梯度稀释实现悬浮细胞精准涂布。两者均需严格把控固定时间、离心参数及涂布密度,配合定向封片技术保障细胞形态完整性,为细胞衰老、免疫标记等研究提供高质量样本载体。
未脱钙骨硬组织切片
采用莱卡硬组织切片机配合钨钢刀片对塑料包埋的骨组织、牙齿等进行切片。然后对骨组织切片进行脱塑及后续特殊染色,用于观察新骨形成、骨组织酶的组织化学检测、医学软硬组织疾病的检测评价等。
石蜡切片
石蜡切片(paraffin section)组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。教学中,光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的。活的细胞或组织多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差,在一般光镜下不易清楚区别出;组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败,失去原有正常结构,因此,组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡,而能清晰辨认其形态结构。
植物标本软化(种子 硬枝)
成熟的种子和干枯的茎秆,木质化程度很高,常规石蜡切片无法完成。需采用化学试剂破坏木质部,降低标本硬度,达到可以制作石蜡切片的目的。本项目针对木质化程度高的种子、茎秆等,利用乙二胺对植物进行软化。化学试剂软化会破坏木质素,影响后续番红固绿、间苯三酚染色等。如果要观察木质部结构,推荐本公司植物硬组织包埋切片服务。
植物标本软化(普通根茎)
成熟的种子和干枯的茎秆,木质化程度很高,常规石蜡切片无法完成。需采用化学试剂破坏木质部,降低标本硬度,达到可以制作石蜡切片的目的。本项目针对木质化程度高的普通植物根、茎等组织,利用乙二胺对植物进行软化。化学试剂软化会破坏木质素,影响后续番红固绿、间苯三酚染色等。如果要观察木质部结构,推荐本公司的植物硬组织包埋切片服务。
骨组织脱钙(慢脱)
骨组织是坚硬的结缔组织,由细胞、纤维、基质组成。骨的最大特点是细胞基质含有大量沉积性钙盐,以构成身体的骨骼系统。由于骨组织质地坚硬,必须要进行脱钙,擦能进行常规病理石蜡制片。本项目采用经典的EDTA螯合剂对骨组织进行脱钙,对抗原破坏程度小,脱钙周期因骨组织大小不同。
骨组织脱钙(快脱)
骨组织是坚硬的结缔组织,由细胞、纤维、基质组成。骨的最大特点是细胞基质含有大量沉积性钙盐,以构成身体的骨骼系统。由于骨组织质地坚硬,必须要进行脱钙,才能进行常规病理石蜡制片。本项目采用混合酸对骨组织进行脱钙,脱钙时间短,但是对组织细胞核染色及抗原会有一定的影响。
组织芯片免疫荧光四标
组织芯片的免疫荧光检测,是将许多不同个体组织标本以规则微阵列方式排布于同一载玻片上,同时进行相同指标的免疫荧光检测。组织芯片荧光四标实验是在同一张组织芯片上对四个抗原进行同时标记,从而实现定性,定位,半定量分析。 组织芯片的免疫荧光检测,标本体积小, 标本信息含量大 , 一次性实验即可获大量结果。实验条件更易控制一致,减少批间批内误差,结果更准确。
组织芯片免疫荧光三标
组织芯片的免疫荧光检测,是将许多不同个体组织标本以规则微阵列方式排布于同一载玻片上,同时进行相同指标的免疫荧光检测。组织芯片荧光三标实验室在同一张组织芯片上对三个抗原进行同时标记,从而实现定性,定位,半定量分析。 组织芯片的免疫荧光检测,标本体积小, 标本信息含量大 , 一次性实验即可获大量结果。实验条件更易控制一致,减少批间批内误差,结果更准确。
尼罗红染色(动物标本)
尼罗红是一种亲脂性的荧光染料,通过与脂类物质(腊酯、三酰甘油以及各种脂肪酸)结合后发出荧光检测信号,快速、敏感、可靠地检测出标本中的脂类成分,在荧光显微镜(或共聚焦显微镜)下呈现桔红色或者红色。
免疫荧光(三标,细胞芯片)
细胞芯片免疫荧光染色,是将许多不同处理的细胞以规则的微阵列方式排列于同一载体上,同时进行相同指标的免疫荧光检测。细胞芯片荧光三标实验是在同一张细胞芯片上对三个抗原进行同时标记,从而实现定性,定位,半定量分析。 细胞芯片的免疫荧光检测,标本体积小, 标本信息含量大 , 一次性实验即可获大量结果。实验条件更易控制一致,减少批间批内误差,结果更准确。
鬼笔环肽染色
鬼笔环肽(phalloidin)可特异性与细胞内聚合微丝中的丝状肌动蛋F-actin结合,通过藕联的荧光素分子,从而显示微丝骨架在细胞中的分布。与抗体相比,鬼笔环肽无物种限制,染色特异性极强,染色区和未染色区对比性非常清晰,而且标记后的肌动蛋白许多生理特性都得以维持。也适用于甲醛固定和去垢剂通透处理后的组织或细胞样本。
WGA荧光染色
麦胚凝集素(WGA)是从谷物中提取出来,可以特异性的结合心肌细胞膜上的一种糖蛋白,二者结合起来可以将心肌细胞膜染出来。WGA可以把心肌细胞膜染出来,这样是否肥大的细胞从图像与正常组的对比就可以看出,也可以用专门的软件对染出的细胞进行直径、面积等的测量,能够分析心肌细胞是否肥大。
ROS荧光染色
二氢乙锭(Dihydroethidium, DHE),可自由透过活细胞进入细胞内,并被细胞内的ROS氧化,形成氧化乙锭;氧化乙锭可掺入染色体DNA中,产生红色荧光。根据活细胞中红色荧光的产生,可以判断细胞ROS含量的多少和变化。
Edu染色
EdU(5-Ethynyl-2’- deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与Apollo®荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性,适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面。
细胞芯片ICC检测+扫描分析
细胞芯片免疫组化染色,是将许多不同处理的细胞以规则的微阵列方式排列于同一载体上,同时进行相同指标的免疫组化检测。该技术具有高通量 、标准化、可重复性高、操作简便等优点。有效解决了细胞爬片细胞易脱落、批间差异大、工作量繁杂、准确性低的问题。细胞芯片是目前基因芯片、蛋白芯片、组织芯片的有力补充。解决了细胞水平高通量、高效检测的困境。
免疫组化
免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。

免疫组化(组织芯片)
组织芯片免疫组化染色,是将多种组织以规则的微阵列方式排列于同一载体上,同时进行相同指标的免疫组化检测。组织芯片具有体积小, 标本信息含量大 , 一次性实验即可获大量结果。实验条件更易控制一致,减少批间批内误差,结果更准确。节省试剂,节省人力物力等优点。

免疫组化(大组织)
免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。传统的石蜡切片由于玻片的限制,大组织的形态结构不能完整的呈现在镜下,特制大玻片和全景数字扫描可以很好的解决这一难题。
电镜统计分析
分析软件:1.Image-pro plus 6.0 (Media Cybernetics, Inc., Rockville, MD, USA) 2. ACDSee Pro 9 (64-bit)
植物硬组织包埋
本方法针对较硬的未软化的植物组织,利用MMA(即甲基丙烯酸甲酯)包埋。采用莱卡硬组织切片机配合钨钢刀片对MMA包埋的植物组织进行切片。然后对植物硬组织切片进行脱塑及后续特殊染色,用于观察植物的木质部结构。
细胞芯片蜡块制作
细胞芯片(细胞微阵列Cell microarray,CMA),是将许多不同处理的细胞以规则的微阵列方式排列于同一载体上,同时进行相同指标检测的原位细胞学研究。该技术具有高通量 、标准化、可重复性高、操作简便等优点。有效解决了细胞爬片细胞易脱落、批间差异大、工作量繁杂、准确性低的问题。细胞芯片是目前基因芯片、蛋白芯片、组织芯片的有力补充。解决了细胞水平高通量、高效检测的困境。
细胞石蜡包埋
细胞石蜡包埋技术通过琼脂糖预包埋固定细胞沉淀,形成稳定三维结构后进行石蜡包埋。该方法可有效防止微量细胞在脱水过程中丢失,适用于循环肿瘤细胞(CTC)、骨髓穿刺液等微量样本的病理分析,兼容HE染色、免疫组化及FISH检测。
未脱钙骨硬组织包埋
本方法针对未脱钙的骨组织,利用MMA(即甲基丙烯酸甲酯)包埋骨组织。采用莱卡硬组织切片机配合钨钢刀片对塑料包埋的骨组织、牙齿等进行切片。然后对骨组织切片进行脱塑及后续特殊染色,用于观察新骨形成、骨组织酶的组织化学检测、医学软硬组织疾病的检测评价等。
TUNEL(组织芯片)检测
晚期凋亡细胞中染色体DNA双链或单链断裂产生粘性3'-OH末端,在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的催化下,将带有荧光素分子的dUTP标记到DNA的3'-末端,然后通过荧光显微镜观察、或进而用带有HRP的一抗染色后DAB显色,可以进行凋亡细胞的检测,该实验称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。
TUNEL(荧光)检测
晚期凋亡细胞中染色体DNA双链或单链断裂产生粘性3'-OH末端,在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的催化下,将带有荧光素分子的dUTP标记到DNA的3'-末端,然后通过荧光显微镜观察、或进而用带有HRP的一抗染色后DAB显色,可以进行凋亡细胞的检测,该实验称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。
TUNEL(细胞芯片)检测
晚期凋亡细胞中染色体DNA双链或单链断裂产生粘性3'-OH末端,在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的催化下,将带有荧光素分子的dUTP标记到DNA的3'-末端,然后通过荧光显微镜观察、或进而用带有HRP的一抗染色后DAB显色,可以进行凋亡细胞的检测,该实验称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。
TUNEL(白光)检测
晚期凋亡细胞中染色体DNA双链或单链断裂产生粘性3'-OH末端,在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的催化下,将带有生物素(Biotin)分子的dUTP,标记到DNA的3'-末端,随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素Streptavidin (Streptavidin-HRP)结合,最后通过DAB显色来显示凋亡细胞,从而可以通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞,这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。
IF TUNEL双染检测
晚期凋亡细胞中染色体DNA双链或单链断裂产生粘性3'-OH末端,在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的催化下,将带有荧光素分子的dUTP标记到DNA的3'-末端,然后通过荧光显微镜观察、或进而用带有HRP的一抗染色后DAB显色,可以进行凋亡细胞的检测,该实验称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。

HE染色
苏木精-伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。