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探针设计合成

技术介绍


根据提供的基因序列,采用寡核苷酸设计软件,设计出候补探针序列,经数据库比对后,判断特异性合格后,按序列合成出对应的核酸序列并标记特定的标记物.


实验流程


1、设计

   设计具有特异性的探针序列

2 、合成

   采用固相亚磷酰胺三酯法,经过四步循环反应:脱保护、耦连、加帽、氧化,逐一将一个一个核苷酸单体连接在3’固相载体上,在过程中将修饰标记在相应位置。

3、氨解

   将合成好的寡聚核苷酸从固体载体(CPG)上化学切割下来,经氨解脱去保护基团。

4、纯化

   粗品质检合格后,对粗品进行HPLC纯化,通过分离度不同分离杂质,制备出目标产物纯品。

5、质检

   利用LTQ-MS质谱仪对目标产物纯品进行检测。

6、定量分装

   利用酶标仪对合格纯品进行A260定量分装,然后用真空干燥机抽干样品至呈干粉状。

 


送样运输要求


干粉状态4度运输。液体状态-20度运输

 


探针设计合成
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