TTC染色,石蜡切片技术里用来染色检测哺乳动物组织的缺血梗塞。TTC是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体,与正常组织中的琥珀酸脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈现苍白色。
染液预热-组织固定在培养皿中-大体切片-37℃避光染色-固定液组织-大体拍照
1、取材:动物麻醉后立即取新鲜组织(如脑、心脏),不经固定液固定,将组织直接放入OCT包埋剂-20℃速冻30min,如果不急用,可以暂时放置-80℃冻存。
2、组织块切片:将冻好的组织稍解冻,用莱卡新刀片手动切片,厚度2-3mm为宜,切面整齐。
3、TTC染色:将切片放入提前37℃预热好的的TTC孵育液中,放入37℃水浴锅中避光孵育 30min,间隔10min轻轻摇动组织,使其均匀接触到染色液,并观察染色结果。
4、拍照:组织成色后,加入固定液终止反应,并避光保存组织,照相机拍照。
TTC染色
组织正常区呈红色,梗死区呈苍白色。
新鲜组织 -80度运输
1、标本越新鲜越好,勿固定,刀片宜薄而锋利,在冰箱中速冻的时间以能顺利切片为宜,
保持切片平整。
2、染色后的标本浸存于固定液中避光保存,染色结果能保存数月,在阳光下易褪色;
3、TTC染色液避光4℃可保存一个月,使用前先复常温。