技术介绍
PAS染色:主要用来检测组织中的糖类。全称为过碘酸雪夫氏染色(schiff periodic acid shiff,PAS),又称糖原染色,其原理为过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛,再与Schiff氏液的无色品红结合,变为红色,定位于胞浆上。在组织学上, PAS染色应用范围广泛:鉴别细胞内空泡状性质、心肌病变及其他心血管疾病的诊断、糖原累积病诊断和研究、糖尿病诊断和研究,除用于糖原的鉴定和黏液的显示外,还可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色。
脱蜡至水-GDS酸化-纯水洗净-雪弗避光染色-流水显色-脱水封片
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗。
2、切片入PAS染色液B中染色10-15min,自来水洗,蒸馏水洗两遍;
3、切片入PAS染色液A浸染25-30min,避光,流水冲洗5min;
4、切片入PAS染色液C染30S,自来水洗,盐酸水溶液分化,自来水洗,氨水返蓝,流水冲洗。
5、脱水封片:切片依次放入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲苯5min-二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片。
6、显微镜镜检,图像采集分析。
糖原、中性粘液物质、软骨基质、植物的真菌和细胞壁、上皮的基膜等均呈紫红色,细胞核浅蓝色。
1.样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上,常温运输送样。切勿固定时间过长,切勿冷冻结冰。
2. 石蜡切片常温运输,冰冻切片-20℃运输。
1、PAS染色液B要经常更换,避免影响染色效果;
2、PAS染色液A染色时要避光。