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VG染色

技术介绍


不同分子量大小的阴离子染料可以跟组织内渗透性大小不同的成分选择性地结合,从而把不同组织成分显示出来。组织和细胞成分都是多孔的结构,孔隙小组织结构致密,渗透性低;孔隙宽组织结构疏松,渗透性高。阴离子染料小分子量者易于穿透结构致密、渗透性低的成分,而大分子量者则只能进入结构疏松、渗透性高的成分。一般来说,结构致密、渗透性低的成分选择小分子染料,而结构疏松、渗透性高的成分选择大分子染料。


实验流程


脱蜡至水-VG染色-分化-酒精脱水-封片。


实验步骤


1、 切片脱塑至水:依次将切片乙二醇乙醚乙酸酯Ⅰ 6 h,37℃,乙二醇乙醚乙酸酯Ⅱ过夜,37℃,乙二醇乙醚乙酸酯Ⅲ室温10-15 min,乙二醇乙醚乙酸酯Ⅳ室温10-15 min,100%Ⅰ乙醇10 min,100%Ⅱ乙醇10 min,95%乙醇10 min,90%乙醇10 min,80%乙醇10 min,自来水洗。

2、 配制VG染液:取Van Gieson(VG)染液B 9 mL,加入Van Gieson(VG)染液A 1 mL混匀;

3、 VG染液染3 min,快速水洗,无水乙醇三缸快速脱水。

4、 透明封片:干净的二甲苯透明1-5 min,中性树胶封片。

5、 显微镜镜检,图像采集分析。


送样运输要求


1.样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上,常温运输送样。切勿固定时间过长,切勿冷冻结冰。

2.石蜡切片常温运输,冰冻切片-20℃运输。


注意事项


水洗要快,防止红色褪掉,无水乙醇也要快脱,防止黄色变暗。

 


VG染色
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