HE染色法全称为苏木精-伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,是石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。
1、切片脱塑至水:依次将切片乙二醇乙醚乙酸酯Ⅰ6 h,37℃,乙二醇乙醚乙酸酯Ⅱ过夜,37℃,乙二醇乙醚乙酸酯Ⅲ室温10-15 min,乙二醇乙醚乙酸酯Ⅳ室温10-15 min,100%Ⅰ乙醇10min,100%Ⅱ乙醇10 min,95%乙醇10 min,90%乙醇10 min,80%乙醇10 min,自来水洗。
2、苏木素染色:切片入苏木素染液染8-10min,自来水洗,分化液分化,自来水洗,返蓝液返蓝,流水冲洗。
3、伊红染色:切片依次入85%、95%的梯度酒精脱水各5min,入伊红染液中染色8-10 min。
4、脱水封片:切片依次放入无水乙醇I5 min,无水乙醇II 5 min,无水乙醇Ⅲ 5 min,二甲Ⅰ 5 min,二甲苯Ⅱ 5 min透明,中性树胶封片。
5、显微镜镜检,图像采集分析。
1. 小鼠-HE染色
样本放置于>10倍样本体积的固定液中固定24h以上,常温运输送样。
切勿固定时间过长,切勿冷冻结冰。
1、注意细胞核的分化程度。
2、注意苏木素和伊红的效价,及时更换染液。