津科生物采用半自动凝血分析仪,通过凝固法,用于检测科研样本的凝血4项:凝血酶原时间 (PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原含量(FIB)、凝血酶时间(TT)。
进行凝血四项检测的样本须为血浆样本,新鲜血浆样本应在2小时内进行检测,如特殊情况导致无法短时间内检测,样本须在-20℃短期保存,-80℃长期保存。将保存的血浆样本取出在37℃水浴快速复温/解冻。
上下颠倒混匀复温后样本,观察是否有絮状物,如有3000rpm,4度离心10min,吸取上清液待检。
PT:将检测试剂平衡到室温后,37℃预热10-30分钟,取血浆50μL 37℃预热3分钟,加入PT试剂100μL立即混匀并计时。
TT:将检测试剂平衡到室温后,取血浆100μL 37℃预热3分钟,加入TT试剂100μL立即混匀并计时。
APTT:将检测试剂平衡到室温后,37℃预热氯化钙溶液10-30分钟,取血浆和检测试剂50μL 37℃预热3分钟,加入氯化钙50μL立即混匀并计时。
FIB:将血浆用咪唑缓冲液稀释10倍,然后将稀释后血浆37℃预热3分钟,加入检测试剂100μL立即混匀并计时。
用移液枪吸取适量样本上机检测,具体操作步骤详见半自动凝血分析仪使用手册。
采集静脉血,立即与0.109mol/L枸橼酸钠溶液按照9:1的比例充分混合均匀,以3000rpm离心10-15min,分离出上层贫血小板血浆。
如果血浆不能在2h内进行测定,应将血浆低温保存(-20℃可保存两周,-80℃可保存6个月),测定前讲血浆于37℃下快速融化。